{"id":2302,"date":"2018-05-11T08:31:13","date_gmt":"2018-05-11T13:31:13","guid":{"rendered":"http:\/\/www.bairesac.com\/blog\/?p=2302"},"modified":"2018-05-11T08:34:54","modified_gmt":"2018-05-11T13:34:54","slug":"fcs-espectroscopia-de-correlacion-de-fluorescencia","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.bairesac.com\/blog\/archivo\/2302","title":{"rendered":"FCS – Espectroscopia de correlaci\u00f3n de fluorescencia"},"content":{"rendered":"

El m\u00e9todo FCS FCS es un m\u00e9todo de medici\u00f3n basado en fluorescencia.<\/p>\n

Las mol\u00e9culas fluorescentes que pasan a trav\u00e9s de un l\u00e1ser fijo fuertemente enfocado se excitan por la emisi\u00f3n de fluorescencia. Despu\u00e9s de pasar un agujero estelar confocal, los fotones emitidos se registran usando detectores muy sensibles.<\/p>\n

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La iluminaci\u00f3n l\u00e1ser en un punto fijo de inter\u00e9s (estacionamiento de haz) excita part\u00edculas fluorescentes en el volumen de excitaci\u00f3n. El movimiento de part\u00edculas dentro y fuera del volumen confocal causa fluctuaciones de intensidad.<\/figcaption><\/figure>\n

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  1. Par\u00e1metros cuantitativos derivados de la curva de autocorrelaci\u00f3n<\/li>\n<\/ol>\n

    Las part\u00edculas en movimiento dan lugar a fluctuaciones de intensidad. Una autocorrelaci\u00f3n de esto revela informaci\u00f3n sobre la escala molecular: la amplitud de la curva de correlaci\u00f3n muestra el n\u00famero de part\u00edcula. El tiempo en el punto de inflexi\u00f3n contiene informaci\u00f3n sobre la movilidad de part\u00edculas. Finalmente, la pendiente y la forma de la curva reflejan el tipo de difusi\u00f3n. La concentraci\u00f3n de part\u00edculas, la masa de part\u00edculas, la viscosidad y la fracci\u00f3n unida se pueden derivar de estos par\u00e1metros.<\/p>\n

    Principio de adquisici\u00f3n y an\u00e1lisis de datos FCS<\/p>\n

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    1. La iluminaci\u00f3n l\u00e1ser en un punto fijo de inter\u00e9s (estacionamiento de haz) excita part\u00edculas fluorescentes en el volumen de excitaci\u00f3n. El movimiento de part\u00edculas dentro y fuera del volumen confocal causa fluctuaciones de intensidad.<\/li>\n
    2. Registro de fluctuaciones de intensidad usando detectores en modo de conteo de fotones individuales.<\/li>\n
    3. C\u00e1lculo de la funci\u00f3n de correlaci\u00f3n.<\/li>\n
    4. Ajuste del modelo biof\u00edsico correspondiente a la curva de correlaci\u00f3n. Obtener par\u00e1metros de inter\u00e9s:<\/li>\n<\/ol>\n