Primero, necesitas fuentes l\u00e1ser en rojo e infrarrojo. Normalmente, estas fuentes, llamadas l\u00e1seres de Ti: Sa (titanio-zafiro), comienzan con longitudes de onda rojas, por ejemplo, 680 nm, y var\u00edan en el infrarrojo, por ejemplo, 1.080 nm. En segundo lugar, se necesitan dos fotones para alcanzar el colorante fluorescente aproximadamente al mismo tiempo. Entonces los dos fotones de, por ejemplo, 1.000 nm, juntos igualan la energ\u00eda de una longitud de onda de excitaci\u00f3n de aproximadamente 500 nm. Este proceso se llama multiphoton o imagenolog\u00eda de dos fotones.<\/p>\n
Cuando la longitud de onda m\u00e1xima del l\u00e1ser IR es de 1.080 nm, la excitaci\u00f3n m\u00e1s larga alcanzable en este proceso de dos fotones equivale aproximadamente a 540 nm. Sin embargo, muchas etiquetas y tintes utilizados en la investigaci\u00f3n biol\u00f3gica necesitan excitarse a longitudes de onda m\u00e1s largas y no pueden utilizarse para formaci\u00f3n de im\u00e1genes de dos fotones, a menos que se utilice una longitud de onda de excitaci\u00f3n superior a 1.080 nm. Con un oscilador param\u00e9trico \u00f3ptico, o OPO, ahora puede utilizar longitudes de onda de excitaci\u00f3n de hasta 1.300 nm en el proceso de formaci\u00f3n de im\u00e1genes de dos fotones. Esto permite colorantes emocionantes con un m\u00e1ximo de excitaci\u00f3n en la microscop\u00eda est\u00e1ndar de un fot\u00f3n de hasta aproximadamente 650 nm, lo cual es una gran mejora en la formaci\u00f3n de im\u00e1genes confocal. Cuantos m\u00e1s colorantes sean posibles y alcanzables con el proceso de dos fotones, m\u00e1s informaci\u00f3n se obtendr\u00e1 de espec\u00edmenes con grandes profundidades de formaci\u00f3n de im\u00e1genes.<\/p>\n
\u00bfCu\u00e1les son las aplicaciones para OPO?<\/strong><\/p>\n Si nos fijamos en las neurociencias, hay un campo llamado conexi\u00f3n, que est\u00e1 relacionado con las conexiones entre las neuronas, o entre las c\u00e9lulas en general. Para obtener una hoja de ruta de las conexiones entre las c\u00e9lulas que necesita tanto una visi\u00f3n general y una resoluci\u00f3n detallada. El objetivo es comprender la funci\u00f3n del tejido – para ver c\u00f3mo funcionan los circuitos. Muchas otras \u00e1reas de investigaci\u00f3n pueden beneficiarse de la OPO. Por ejemplo, en la biolog\u00eda del desarrollo es crucial proteger el tejido del fotodamado durante la imagen intravital del embri\u00f3n, as\u00ed como la penetraci\u00f3n profunda de los tejidos altamente dispersantes. Aqu\u00ed, las longitudes de onda de excitaci\u00f3n m\u00e1s largas generadas por la OPO son \u00f3ptimas. Adicionalmente, el OPO es \u00fatil para el uso de colorantes rojo y rojo lejano para la formaci\u00f3n de im\u00e1genes multifot\u00f3n. Incluso la excitaci\u00f3n simult\u00e1nea de dos colorantes a dos longitudes de onda diferentes es posible con el OPO.<\/p>\n \u00bfC\u00f3mo funciona un OPO?<\/strong><\/p>\n Es importante notar que una OPO utiliza la \u00f3ptica no lineal, que la f\u00edsica subyacente no es f\u00e1cil de explicar. Sin embargo, piense en los fotones individuales de un l\u00e1ser de bombeo, que dejan la fuente de IR. En un resonador \u00f3ptico y un cristal anon-lineal, los fotones de la bomba se superponen y producen una se\u00f1al y un rodillo intermedio. Esas tres ondas, la bomba, la se\u00f1al y el intermedio, interact\u00faan en el cristal no lineal. La se\u00f1al – que es lo que quiere – gana poder con cada viaje de ida y vuelta en el resonador. Esto se denomina amplificaci\u00f3n param\u00e9trica de la se\u00f1al, y la bomba pierde potencia en consecuencia. La se\u00f1al se acopla entonces y se utiliza para la formaci\u00f3n de im\u00e1genes por infrarrojos.<\/p>\n <\/p>\n <\/p>\n Cortes\u00eda de Evelyne Beerling, Jacco van Rheenen, Instituto Hubrecht, Utrecht, Pa\u00edses Bajos – Leica Microsystems.<\/em><\/p>\n <\/p>\n *OPO (oscilador de par\u00e1metro \u00f3ptico)<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":" Las secciones gruesas del tejido fino de la imagen as\u00ed como los de animales enteros desempe\u00f1a un papel creciente en la investigaci\u00f3n de las ciencias de la vida. Obtener informaci\u00f3n espacial en \u00e1reas de tejidos profundos es crucial para entender completamente los procesos biol\u00f3gicos. 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