{"id":1802,"date":"2017-06-19T10:52:44","date_gmt":"2017-06-19T15:52:44","guid":{"rendered":"http:\/\/www.bairesac.com\/blog\/?p=1802"},"modified":"2017-06-20T11:26:31","modified_gmt":"2017-06-20T16:26:31","slug":"cuidado-con-el-aumento-vacio","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.bairesac.com\/blog\/archivo\/1802","title":{"rendered":"Cuidado con el aumento \u00abvac\u00edo\u00bb"},"content":{"rendered":"

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En el caso m\u00e1s simple, un microscopio \u00f3ptico consiste en una lente cerca de la muestra (objetivo) y una lente cerca del ojo (ocular). El aumento \u00a0del microscopio es el producto de los factores de ambas lentes de microscopio. Un objetivo de 40x y un ocular de 10x, por ejemplo, proporcionan un aumento de 400x.<\/p>\n

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La onda luminosa define el l\u00edmite\u00a0<\/strong><\/p>\n

Sin embargo, no es s\u00f3lo la ampliaci\u00f3n, sino tambi\u00e9n la resoluci\u00f3n que indica la capacidad de rendimiento de un microscopio \u00f3ptico. La resoluci\u00f3n es la capacidad de hacer dos puntos estrechamente adyacentes por separado. De acuerdo con el criterio de Rayleigh, la distancia m\u00ednima entre dos puntos capaces de ser imagen por separado corresponde aproximadamente a la mitad de la longitud de onda de la luz.<\/p>\n

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\u039b = longitud de onda de la luz N = \u00edndice de refracci\u00f3n del medio entre el esp\u00e9cimen y el objetivo \u0391 = la mitad del \u00e1ngulo de apertura del objetivo<\/figcaption><\/figure>\n

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Por lo tanto, con luz azul, el l\u00edmite de resoluci\u00f3n es aproximadamente d = 0,2 \u03bcm; Con luz roja, alrededor de d = 0,35 \u03bcm. Los objetivos UV alcanzan una resoluci\u00f3n de apenas 0,2 \u03bcm. A simple vista, no somos capaces de diferenciar estructuras menores de 0,2 mil\u00edmetros.<\/p>\n

El valor n \u00d7 sen \u03b1 corresponde a la apertura num\u00e9rica (NA), la medida de la capacidad de captaci\u00f3n de luz y la resoluci\u00f3n de un objetivo. Debido a que el \u00e1ngulo de apertura no puede exceder 90 \u00b0 y el \u00edndice de refracci\u00f3n nunca es inferior a 1 (nair = 1), NA es siempre alrededor de 1 para el aire. Cuando se utiliza aceite de inmersi\u00f3n (n> 1), la apertura num\u00e9rica aumenta (hasta aproximadamente 1,45) y, junto con ella, la resoluci\u00f3n.<\/p>\n

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Fig: 1: El espectro de la luz visible<\/figcaption><\/figure>\n
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Fig 2: La apertura num\u00e9rica del objetivo determina la resoluci\u00f3n de detalle y el brillo de la imagen<\/figcaption><\/figure>\n

Mayor aumento no siempre es mejor\u00a0<\/strong><\/p>\n

Para hacer la resoluci\u00f3n microsc\u00f3pica detectable al ojo, la imagen aparece en el ocular con la ampliaci\u00f3n correspondiente. La resoluci\u00f3n y la ampliaci\u00f3n son siempre directamente interdependientes. Un objetivo con baja ampliaci\u00f3n tiene una apertura num\u00e9rica baja y por tanto una baja resoluci\u00f3n. Para un objetivo de alta ampliaci\u00f3n, la apertura num\u00e9rica tambi\u00e9n es alta, t\u00edpicamente 0,8 para un objetivo seco de 40x. Sin embargo, debido a que la apertura num\u00e9rica no puede aumentarse m\u00e1s all\u00e1 de cierto punto, el rango de aumento utilizable tambi\u00e9n est\u00e1 limitado en microscopios de luz cl\u00e1sicos. La ampliaci\u00f3n del microscopio \u00ab\u00fatil\u00bb est\u00e1 entre 500 x NA y 1.000 x NA.\u00a0Algunos microscopios de luz cuentan con una ampliaci\u00f3n enorme, pero pr\u00e1cticamente hablando, el l\u00edmite es un poco menos de 1.400x. Los especialistas llaman a todo m\u00e1s all\u00e1 de esa \u00abampliaci\u00f3n vac\u00eda\u00bb. Aunque las estructuras parecen m\u00e1s grandes, pero no se resuelven detalles adicionales.<\/p>\n

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Fig. 3: Metal duro con 10% de cobalto (estructura sub-\u03bcm, tama\u00f1o inicial de grano de 0,6 \u03bcm) para la producci\u00f3n de herramientas pesadas. Izquierda: vista con objetivo seco, NA = 0,90; Derecha: vista con objetivo de inmersi\u00f3n en aceite, NA = 1,30 (Cortes\u00eda de Konrad Friedrichs GmbH & Co KG, Kulmbach, Alemania)<\/figcaption><\/figure>\n

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En el caso m\u00e1s simple, un microscopio \u00f3ptico consiste en una lente cerca de la muestra (objetivo) y una lente cerca del ojo (ocular). El aumento \u00a0del microscopio es el producto de los factores de ambas lentes de microscopio. Un objetivo de 40x y un ocular de 10x, por ejemplo, proporcionan un aumento de 400x. 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