{"id":1678,"date":"2017-05-02T14:46:06","date_gmt":"2017-05-02T19:46:06","guid":{"rendered":"http:\/\/www.bairesac.com\/blog\/?p=1678"},"modified":"2017-05-02T14:46:06","modified_gmt":"2017-05-02T19:46:06","slug":"factores-a-tener-en-cuenta-al-seleccionar-un-microscopio-de-investigacion","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.bairesac.com\/blog\/archivo\/1678","title":{"rendered":"Factores a tener en cuenta al seleccionar un microscopio de investigaci\u00f3n"},"content":{"rendered":"

\u00a0\u00bfCu\u00e1l es el microscopio de investigaci\u00f3n adecuado para m\u00ed? Este art\u00edculo le da una breve descripci\u00f3n de las principales caracter\u00edsticas que debe tener en cuenta al elegir un microscopio de investigaci\u00f3n \u00f3ptica.<\/strong><\/p>\n

Un microscopio \u00f3ptico es a menudo uno de los dispositivos centrales en un laboratorio de investigaci\u00f3n y de las ciencias de la vida. Se puede utilizar para diversas aplicaciones que arrojan luz sobre muchas cuestiones cient\u00edficas. Por lo tanto, la configuraci\u00f3n y las caracter\u00edsticas del microscopio son cruciales para su cobertura de aplicaci\u00f3n, que van desde el campo brillante a trav\u00e9s de microscop\u00eda de fluorescencia a c\u00e9lulas vivas de im\u00e1genes.<\/p>\n

Este art\u00edculo proporciona una breve descripci\u00f3n de las caracter\u00edsticas del microscopio relevante y envuelve las preguntas clave que debe tener en cuenta al seleccionar un microscopio de investigaci\u00f3n.<\/p>\n

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\u00bfQu\u00e9 tipo de esp\u00e9cimen usas?<\/strong><\/p>\n

Una de las primeras cosas a considerar al seleccionar un microscopio de investigaci\u00f3n es el tipo de esp\u00e9cimen que desea explorar. Para muestras fijas montadas en una diapositiva delgada de cristal, puede utilizar un microscopio vertical. Las c\u00e9lulas vivas requieren caracter\u00edsticas especiales del microscopio porque se mantienen en recipientes de cultivo celular relativamente grandes llenos de medios de cultivo celular.<\/p>\n

S\u00f3lo una configuraci\u00f3n invertida, con el objetivo a continuaci\u00f3n y el condensador por encima de la muestra, facilita el espacio libre esencial y la proximidad requerida del objetivo a la muestra. Al mismo tiempo, un microscopio invertido mantiene una buena accesibilidad a las c\u00e9lulas, p. Para a\u00f1adir micromanipuladores.<\/p>\n

Adem\u00e1s, las c\u00e9lulas vivas requieren un ambiente adecuado para sobrevivir. La temperatura y la concentraci\u00f3n de CO2 deben mantenerse en ciertos niveles. Una c\u00e1mara clim\u00e1tica con los controladores correspondientes es necesaria para realizar esta tarea.<\/p>\n

\"\"<\/a>
Un microscopio vertical presenta el objetivo anterior y el condensador debajo de la muestra. A la derecha: En un microscopio invertido este montaje se gira dando a los usuarios m\u00e1s espacio m\u00e1s la proximidad requerida del objetivo a la muestra.<\/figcaption><\/figure>\n

\u00bfEn qu\u00e9 dimensiones piensas?<\/strong><\/p>\n

La muestra microsc\u00f3pica se extiende en tres dimensiones: longitud, anchura y altura. Mientras que algunos espec\u00edmenes, como las secciones histol\u00f3gicas, se representan s\u00f3lo en la direcci\u00f3n xy, existen otras aplicaciones que requieren adquisici\u00f3n tambi\u00e9n en la dimensi\u00f3n z. Para visualizar vol\u00famenes 3D, p. De las c\u00e9lulas vivas, se recomienda un rev\u00f3lver motorizado objetivo que es capaz de guiar a su muestra paso a paso a trav\u00e9s del enfoque. El software de imagen debe ser capaz de reconstruir las im\u00e1genes individuales para la visualizaci\u00f3n 3D.<\/p>\n

Para las c\u00e9lulas vivas tienes que a\u00f1adir el tiempo de la dimensi\u00f3n. En este caso, por ejemplo, la estabilidad del sistema es otra caracter\u00edstica cr\u00edtica. Debido al hecho de que los cambios de temperatura influyen en el sistema de imagen durante la adquisici\u00f3n, las medidas efectivas de contador son esenciales. Un ajuste autom\u00e1tico del enfoque, como el control de enfoque adaptativo (AFC), contrarresta estas influencias t\u00e9rmicas y siempre encuentra el enfoque predefinido.<\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

\u00bfQu\u00e9 m\u00e9todo de contraste se adapta mejor a su muestra?<\/strong><\/p>\n

La mayor\u00eda de las c\u00e9lulas – especialmente c\u00e9lulas animales – investigadas con un microscopio no tienen suficiente contraste intr\u00ednseco para ver detalles finos. Los investigadores usan m\u00e9todos de contraste para solucionar este problema. Mientras que el contraste de fase (PH) y el contraste de interferencia diferencial (DIC) manipulan la luz que pasa a trav\u00e9s de la muestra para a\u00f1adir contraste, tambi\u00e9n se puede te\u00f1ir con tintes fluorescentes (inmunofluorescencia), respectivamente, utilizar prote\u00ednas fluorescentes.<\/p>\n

De acuerdo con el m\u00e9todo de contraste, el microscopio necesita equipo espec\u00edfico; p.ej. El contraste de fase necesita objetivos especiales mientras que DIC utiliza ciertos prismas que tienen que ser cambiados en el camino de la luz. Para la microscop\u00eda de fluorescencia se necesitan cubos de filtros especiales que permitan la correcta longitud de las ondas de luz para acceder y salir de la muestra.<\/p>\n

\"\"<\/a><\/p>\n

\u00bfQu\u00e9 pasa con la fuente de luz?<\/strong><\/p>\n

La elecci\u00f3n del m\u00e9todo de contraste tambi\u00e9n determina la fuente de luz. La iluminaci\u00f3n de la luz transmitida para la microscop\u00eda de campo claro convencional, el contraste de fase y la DIC puede realizarse con iluminaci\u00f3n hal\u00f3gena o LED. La microscopia de fluorescencia se puede realizar con iluminaci\u00f3n LED o con la ayuda de mercurio, xen\u00f3n o l\u00e1mparas de halogenuros met\u00e1licos de mercurio.<\/p>\n

\u00bfDesea documentar o publicar sus resultados?<\/strong><\/p>\n

Si desea tomar una imagen de su esp\u00e9cimen o hacer im\u00e1genes de c\u00e9lulas vivas, necesita una c\u00e1mara de microscopio digital. Especialmente en el caso de im\u00e1genes fluorescentes de c\u00e9lulas vivas se recomienda una c\u00e1mara sensible para minimizar la cantidad de luz de excitaci\u00f3n que puede da\u00f1ar las c\u00e9lulas. Adem\u00e1s de las bien establecidas c\u00e1maras CCD y EMDDC, hoy en d\u00eda sCMOS c\u00e1maras se puso en marcha debido a su alta eficiencia cu\u00e1ntica y velocidad de adquisici\u00f3n. Para obtener m\u00e1s informaci\u00f3n sobre las c\u00e1maras digitales de microscopio, lea el art\u00edculo Introducci\u00f3n a la tecnolog\u00eda de c\u00e1maras digitales.<\/p>\n

Adem\u00e1s, un gran campo de visi\u00f3n (FOV) ayuda a encontrar \u00e1reas interesantes con mayor rapidez ya imaginar m\u00e1s c\u00e9lulas al mismo tiempo. Los modernos microscopios de investigaci\u00f3n cuentan con un FOV de 19 mm en el puerto de la c\u00e1mara que coincide perfectamente con un chip de c\u00e1mara de 19 mm sCMOS.<\/p>\n

\u00bfQuieres manipular tus c\u00e9lulas en el microscopio?<\/strong><\/p>\n

Durante los \u00faltimos a\u00f1os, la foto-manipulaci\u00f3n de la muestra se hizo popular. Eso significa que los investigadores no solo observan las c\u00e9lulas vivas sino que las manipulan con la ayuda de la luz. La recuperaci\u00f3n de la fluorescencia despu\u00e9s de Photobleaching (FRAP) es un ejemplo que ayuda a desentra\u00f1ar los procesos celulares din\u00e1micos. Para este tipo de t\u00e9cnicas de manipulaci\u00f3n a menudo se necesitan fuentes de luz adicionales que tienen que ser integrados en el trayecto de la luz del microscopio. Este enfoque no es trivial. El puerto Leica Infinity es una soluci\u00f3n universal que combina fuentes de luz adicionales en el trayecto de la luz del microscopio sin alterar la calidad de la imagen para hacer, p. FRAP, foto-conmutaci\u00f3n, ablaci\u00f3n u optogen\u00e9tica. Con el adaptador adecuado a mano, los investigadores pueden incluso acoplar sus dispositivos hechos en casa.<\/p>\n

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\u00bfQui\u00e9n usar\u00e1 el microscopio?<\/strong><\/p>\n

La gama de usuarios de microscopio puede ser muy heterog\u00e9nea. Especialmente en la universidad los usuarios pueden ser muy experimentados o principiantes absolutos. Por lo tanto, un sistema de microscopio f\u00e1cil de usar que funciona con un software intuitivo, como el Leica Application Suite X (LAS X), ayuda a que la gente comience r\u00e1pidamente y adquiera datos r\u00e1pidamente. Por ejemplo, un dise\u00f1o orientado al flujo de trabajo, asistentes de an\u00e1lisis de im\u00e1genes y una integraci\u00f3n perfecta de perif\u00e9ricos en el sistema simplifican su trabajo<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

\u00a0\u00bfCu\u00e1l es el microscopio de investigaci\u00f3n adecuado para m\u00ed? Este art\u00edculo le da una breve descripci\u00f3n de las principales caracter\u00edsticas que debe tener en cuenta al elegir un microscopio de investigaci\u00f3n \u00f3ptica. Un microscopio \u00f3ptico es a menudo uno de los dispositivos centrales en un laboratorio de investigaci\u00f3n y de las ciencias de la vida. 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